Warianty genów raka piersi: oddzielanie szkodliwych od nieszkodliwych cd

Opracowanie łatwego systemu do ekspresji ektopowej ludzkiego BRCA1 pod kontrolą jego endogennych elementów regulatorowych byłoby oczywistą korzyścią dla podstawowych i translacyjnych badań obejmujących VUS lub syntetycznie zaprojektowane allele BRCA1. Rysunek Metody oceny funkcji ludzkich alleli BRCA1 VUS. (A) Struktura domeny BRCA1, przedstawiająca N-końcową domenę RING, region kodowany przez egzon 11y i C-końcowe powtórzenia BRCT. Mutacje powodujące raka i zmiany VUS występują w każdym z tych regionów. Wpływ VUS, które występują w domenach RING i BRCT, można badać pod kątem wpływu odpowiednio na aktywność ligazy ubikwitynowej E3 i interakcje z białkami. (B) Ludzki system odtwarzania BRCA1 BAC opisany przez Chang, Sharan i współpracowników w tym wydaniu JCI, w którym ludzkie DNA BRCA1 BAC z dowolną mutacją można wprowadzić do mysich komórek ES zawierających warunkowy allel Brca1, umożliwiając in vitro badanie VUS w dowolnym miejscu w ludzkim genie BRCA1 i ich wpływ na żywotność komórek, naprawę DNA, embriogenezę i karcinogenezę gruczołów sutkowych (15). Autorzy zatwierdzili swój system in vitro, przeprowadzając dalsze badania znanych, obojętnych i szkodliwych wariantów BRCA1 u myszy. Humanizowanie myszy: nowe podejście do rozumienia BRIS VUS W tym wydaniu JCI, Chang, Sharan i współpracownicy zgłaszają eleganckie podejście do oceny klinicznych i eksperymentalnie zaprojektowanych alleli z błędami BRCA1 (15). BAC zawierające ludzki gen BRCA1 i jego wymagane elementy regulatorowe zostały zaprojektowane tak, aby zawierały interesującą mutację punktową, a następnie wprowadzono je do mysich komórek ES niosących warunkowy allel mysiego genu Brca1. Ten sprytny zestaw etapów inżynierii umożliwił badaczom usunięcie endogennego mysiego allela Brca1, a następnie zbadanie ludzkich alleli BRCA1 VUS dla funkcji in vivo (Figura 1B). Transgeniczna ekspresja tego ludzkiego BRCA1 BAC u myszy nullizygotycznych pod względem mysiego allela Brca1 podtrzymywała żywotność bez wykrywalnego fenotypu przez dorosłość (16). Odwrotnie, myszy pozbawione BRCA1 umierają wcześnie w rozwoju zarodkowym. Pozornie, ludzkie konstrukty BAC BRCA1 zawierają odpowiednie elementy regulacyjne do ekspresji BRCA1 we właściwym czasowym i przestrzennym sposobie, a ludzkie białko BRCA1 spełnia wszystkie niezbędne funkcje myszy, aby pomyślnie poruszać się w ostrych kryteriach rozwoju zarodkowego i postemięśniowego. Ponieważ mutacje powodujące raka powodują zaburzenie funkcji BRCA1, zakłada się, że klinicznie istotne VUS nie będą wspierać rentowności w tym kontekście. Autorzy wykorzystali ten ludzki system odtwarzania BRCA1 BAC do zbadania 13 różnych alleli BRCA1 w mysich komórkach ES, a 3 z tych wariantów wybrano do badań in vivo podczas embriogenezy myszy (15)
[podobne: laboratorium biała podlaska, krem pomidorowo paprykowy, jak oddychać przy bieganiu ]
[hasła pokrewne: nużeniec ludzki leczenie, zakwasy wikipedia, przychodnia nova chojnice ]