STALing odpowiedzi komórek B za pomocą CD22 ad

Podawanie tych antygenowych liposomów indukujących indukcję tolerancji SIGLEC (STAL, w których SIGLEC definiuje się jako wiążącą kwas sialowy a-Ig) do myszy znacząco zmniejszyło odpowiedzi przeciwciał IgM i IgG po kolejnych prowokacjach tymi samymi cząstkami, które nie mają CD22L (immunogenne liposomy). ). Wykazano indukcję tolerancji komórek B przez STAL dla kilku różnych Ag, w tym zarówno niezależnych od komórek T, jak i zależnych od limfocytów T. Do indukcji tolerancji wymagane były zarówno sprzężenie CD22, jak i BCR w tej samej komórce: liposomy zawierające tylko CD22L nie tłumiły globalnie odpowiedzi komórek B, a STAL nie tłumiły odpowiedzi Ab na niespokrewnione Ag. Zatem tolerancja wywołana przez STAL była specyficzna dla Ag (2). Continue reading „STALing odpowiedzi komórek B za pomocą CD22 ad”

Wzbogacanie genów

ZnalezioneWśród wzbogaconych genów ukierunkowanych na miRNA w szlaku rozwoju układu nerwowego były NLGN1 i NTF3. NLGN1 koduje neuroliginę 1, która jest postsynaptyczną cząsteczką adhezyjną zaangażowaną w regulację transmisji glutaminergicznej. Niedawno wykazano, że NLGN1 ulega ekspresji podczas chondrogenezy i wyznacza tożsamość komórkową chondrocytów stawowych.27 NTF3 koduje neurotrofinę-3, członka rodziny neurotrofin, która kontroluje przeżycie i różnicowanie neuronów ssaków. Białko jest blisko spokrewnione z czynnikiem wzrostu nerwów i neurotropowym czynnikiem pochodzenia mózgowego. W naszym zestawie danych priorytetowo traktowaliśmy gen NTF3 jako prawdopodobny cel miR-502-3 p i zaangażowany w patofizjologię OA. To odkąd NTF3 jest wysoce znacząco podwyższony (FC = 2,7, FDR = 6,6 × 10-6), a miR-502-3 p jest znacząco obniżony (FC = 0,8, FDR = 0,04) w uszkodzonej chrząstce OA, ekspresja NTF3 i miR -502-3 p było odwrotnie skorelowane (r = -0,57, p = 0,007), i są przewidywaną parą docelową mRNA-miRNA (wynik miTG = 0,473). Celowanie w takie dysfunkcjonalne oddziaływanie miRNA-mRNA może stanowić terapeutyczną obietnicę dla rozwoju przedklinicznego, na przykład poprzez zastosowanie miRNA naśladowców miR-502-3 p. Na przykładzie naszej funkcjonalnej walidacji bezpośrednie oddziaływanie docelowe miRNA-mRNA powinno być jednak starannie ocenione, na przykład, za pomocą testów lucyferazy. Ponadto, zalecamy, aby podejście oparte na systemach antyagomirowych lub transfekcjach miR naśladujących, a następnie sekwencjonowanie RNA, było podejmowane w celu uzyskania dokładnego zrozumienia wszystkich zaangażowanych mechanizmów biologicznych. Wreszcie, należy opracować narzędzia bioinformatyczne, które uwzględniają lub wykorzystują fakt, że sekwencja nasienia miRNA (nukleotydy 2 i 7) może być skierowana na region 3UTR wielu mRNA28 lub może wiązać się z innymi częściami gen. Razem, nasz interferome miRNA reprezentuje kompleksową spuściznę, aby bezpośrednio sondować interesujące miRNA z ich prawdopodobnymi szlakami sygnałowymi w dół, przewidywaniami celu i / lub doświadczalnymi walidacjami z odpowiednich baz danych. Fakt, że niektóre z tych narzędzi wykorzystują kryteria publikacji jako eksperymentalne walidacje par docelowych miRNA-mRNA, powinien podnieść świadomość, że może to zakłócić złożone interakcje docelowe miRA-mRNA, zamiast je oświetlać.

Analizy szlaków docelowych genów

ZnalezionePoprzez integrację nakładającego się sekwencjonowania RNA mRNA i miRNA w sparowanych zachowanych i uszkodzonych próbkach chrząstki OA, przedstawiliśmy pierwszy kompleksowy, specyficzny dla OA, interakcji miRNA. W tym celu zidentyfikowaliśmy 142 miRNA i 2387 genów o istotnym DE między uszkodzoną i zakonserwowaną chrząstką. Dzięki rygorystycznemu schematowi priorytetyzacji stworzyliśmy nowy, spokrewniony z OA, miRNA, proton z 62 miRNA i ich 238 prawdopodobnie docelowych mRNA. Kolejne analizy szlaków docelowych genów miRNA wykazały znaczące wzbogacenie genów, które działają między innymi w pozytywnej regulacji aktywności GTPazy i rozwoju układu nerwowego. Aby umożliwić biologiczną interpretację niektórych wyróżnionych klastrów, przeprowadzono eksperymenty walidacji funkcjonalnej z antagomirami i mimikami. Zaobserwowaliśmy, że naśladowcy miR-143-3 p, z pojedynczą korelacją z genami GHR, SMAD3, AMIGO1 i DCAKD, wykazywali konsekwentny odwrotny wpływ na ekspresję genów. Z drugiej strony, antagomirs i imitacje miR-99a-3p i miR-329-3 p, oba sparowane z genami WNT9A, FZD1 i GDF6 , miały stały wpływ na ekspresję genu, ale w zmiennych kierunkach. Łącznie, nasze dane sugerują, że oddziałujące poziomy miRNA wspólnie wpływają na ekspresję genów w chrząstce, ale są przykładem złożoności funkcjonalnej weryfikacji sieci miRNA-mRNA.
[patrz też: zakwasy wikipedia, przychodnia nova chojnice, przychodnia cepelek ]

Wzbogacanie szlaku

ZnalezioneAnaliza wzbogacania szlaku została przeprowadzona przy użyciu narzędzia online DAVID21 przy wyborze terminów Gene Ontology dla procesów biologicznych (GOTERM_BP_DIRECT). Wartości p wielokrotności korygowanej testem Bonferroniego z wartością odcięcia istotności wynoszącą 0,05 są zgłaszane jako wartość błędu rodzinnego (FWER). Analizy wzbogacania genów DE za pomocą FC ≥2 przeprowadzono oddzielnie dla dalszego porównania. Aby dokładnie zidentyfikować szlaki regulowane przez miRNA w chrząstce OA, wzbogacono geny celu miRNA przy użyciu wszystkich znaczących genów DE (FDR <0,05) jako tła.

Walidacja funkcjonalna

Pierwotne chondrocyty izolowane od trzech niezależnych dawców transfekowano antyagomirami i miR-mimikami dla miR-143-3 p, miR-329-3 p i miR-99a-3p, stosując odczynnik do transfekcji Lipofectamine RNAiMAX (Invitrogen) zgodnie z protokołem producenta. Przeprowadzono PCR ilościowy z odwrotną transkryptazą (RT-qPCR), dostosowując się do genów GAPDH i ARP do utrzymywania czystości.


[więcej w: dna moczanowa icd 10, profichol forte, nużeniec ludzki leczenie ]

IL-1 i miażdżyca: mysi zwrot w ewoluującą ludzką historię cd

Obserwacja ta spotkała się z dużym zainteresowaniem ze względu na jasną ścieżkę łączącą inflammasom z miażdżycą tętnic oraz implikacje dla nowych podejść terapeutycznych (10, 16, 17). Anty-IL-1. terapia i ostre zdarzenia wieńcowe: badanie kliniczneZwracane przez dane łączące inflamasom / NL-1 NLRP3. droga do aterogenezy (12, 13) i wcześniejsze prace wskazujące na przyczynową rolę IL-1. w promowaniu miażdżycy u myszy (18, 19), niedawno rozpoczęto ambitne badanie kliniczne. Continue reading „IL-1 i miażdżyca: mysi zwrot w ewoluującą ludzką historię cd”

IL-1 i miażdżyca: mysi zwrot w ewoluującą ludzką historię ad

Jednak znaczenie tych badań dla ludzkiej miażdżycy pozostaje niepewne w przypadku braku bezpośrednich, randomizowanych, kontrolowanych badań klinicznych z udziałem ludzi. Od kilku lat obserwuje się potencjalną rolę prozapalnej cytokiny IL-1 w aterogenezie (4). Zarówno IL-1. i IL-1. aktywują receptor IL-1 typu I (IL-1R1), a antagonista receptora IL-1 (IL-1ra) konkurencyjnie hamuje ich wiązanie. Continue reading „IL-1 i miażdżyca: mysi zwrot w ewoluującą ludzką historię ad”

IL-1 i miażdżyca: mysi zwrot w ewoluującą ludzką historię

Zapalenie jest krytycznym elementem miażdżycy. IL-1 jest klasyczną prozapalną cytokiną związaną z miażdżycą. Rozpoczęto badanie kliniczne, w którym przeciwciało swoiste dla IL-1. jest badany pod kątem jego wpływu na zdarzenia sercowo-naczyniowe u pacjentów z miażdżycą. W tym wydaniu JCI, Alexander et al. Continue reading „IL-1 i miażdżyca: mysi zwrot w ewoluującą ludzką historię”

STALing odpowiedzi komórek B za pomocą CD22 czesc 4

Odpowiedzi indukowane przez DC można wzmocnić przez podawanie sygnałów kostymulujących, takich jak agoniści TLR7 lub TLR9, wraz z docelową Ag (11, 14). Podobnie wykazano, że sieciowanie BDCA2 na pDC negatywnie reguluje produkcję interferonu, co wskazuje, że może on odgrywać rolę w promowaniu tolerancji immunologicznej (15, 16). Zatem dostarczanie Ag do DC ma zdolność do regulowania odpowiedzi limfocytów B bezpośrednio lub pośrednio, w zależności zarówno od receptora, który jest celem, jak i typu kostymulacji (aktywacji lub hamowania), który jest dostarczany wraz z Ag. Figura podsumowuje cele komórkowe i molekularne, które z powodzeniem zastosowano do modulowania odpowiedzi komórek B specyficznych dla Ag. STALowanie hemofilii Zapobieganie szkodliwemu wytwarzaniu Ab przez komórki B jest nie tylko pożądane w warunkach autoimmunologicznych, ale ma olbrzymi potencjał w przypadkach, w których anty-leki Abs są zaporowe, szczególnie w przypadku leków biologicznych. Continue reading „STALing odpowiedzi komórek B za pomocą CD22 czesc 4”

STALing odpowiedzi komórek B za pomocą CD22 cd

Schemat metod uzyskiwania aktywacji lub inhibicji komórek B specyficznych względem Ag lub nieswoistych. STAL bezpośrednio indukują tolerancję na komórki B specyficzne dla Ag, jednocześnie kierując AG do BCR razem z sygnałami hamującymi dostarczanymi przez ligandy CD22. Alternatywnie, dostarczenie Ag do BCR razem z sieciowaniem CD180 skutkuje aktywacją komórek B specyficznych dla Ag i produkcją Ab. Odpowiedzi komórek B można także modulować przez dostarczanie Ag do receptorów znajdujących się na podzestawach DC. Ag skierowane na SIGLEC-H lub BDCA2 znalezione na pDC pośrednio hamuje odpowiedzi komórek B przez hamowanie aktywacji komórek efektorowych T CD4 +, podczas gdy odpowiedzi komórek B specyficzne wobec Ag można indukować przez dostarczanie Ag do pewnych receptorów lektyny typu C znajdujących się na DC szpiku. Continue reading „STALing odpowiedzi komórek B za pomocą CD22 cd”

Regeneracja śródbłonka jako nowa strategia terapeutyczna ostrego uszkodzenia płuc czesc 4

Twierdzą, że ograniczona delecja komórek FoxM1 w komórkach śródbłonka znacznie upośledza regenerację komórek śródbłonka płucnego i zwiększa przepuszczalność naczyń, zmniejszając w ten sposób przeżywalność po ALI z powodu ciężkiego obrzęku płuc. Uszkodzona naprawa komórek śródbłonka u myszy Foxko1 CKO nie jest przypisana delecji FoxM1 w komórkach szpiku kostnego Tie2-dodatniego, ponieważ przeszczepianie komórek szpiku kostnego dzikiego typu myszom FoxM1 CKO nie miało wpływu na zwiększoną przepuszczalność naczyń. Chociaż delecja FoxM1 może bezpośrednio wpływać na przepuszczalność śródbłonka, początkowy wzrost przepuszczalności naczyń po prowokacji LPS, jak również wzrost podstawowej funkcji bariery śródbłonkowej w płucu myszy Foxko1 CKO był podobny do tego u myszy typu dzikiego. Podczas gdy stopień śródbłonkowej apoptozy po leczeniu LPS nie różnił się pomiędzy FoxM1 CKO i myszami typu dzikiego, proliferacja śródbłonka była istotnie upośledzona w płucach zwierząt CK FoxM1 po uszkodzeniu, co sugeruje, że brak proliferacji śródbłonka może być główną przyczyną przedłużony wzrost przepuszczalności naczyń. Jednakże nie można wykluczyć możliwości, że niedobór FoxM1 w innych łożyskach naczyniowych może zmniejszyć odzyskiwanie myszy FoxM1 CKO po prowokacji LPS. Continue reading „Regeneracja śródbłonka jako nowa strategia terapeutyczna ostrego uszkodzenia płuc czesc 4”